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上海金相抛光机存活、殒命之测定法
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上海金相抛光机存活、殒命之测定法
一、 相位差金相试样抛光机(phase-contrastmicroscope)
使用相位差金相试样抛光机,察看给药前后上海金相抛光机型态,以理解上海金相抛光机经药物处置后
型态的变革,评价药物对上海金相抛光机形态的影响。
二、 上海金相抛光机存活率之测定:MTT 复原剖析法(3-(4,5-dimethylthianol-2-yl)-2,5
diphenyltetrazolium bromide reduction assay)

一、原理
正常安康的上海金相抛光机,其上海金相抛光机粒腺体内膜的琥珀酸去氢醣(succinate
dehydrogenase)具有将 MTT(黄色)复原为 MTT-formazan(紫色)的能
力。而紫色颜色的深浅水平可代表复原才能的强弱,即琥珀去氢醣的活性,同时也反响粒腺体的心理情况。
由于粒腺体是上海金相抛光机内对情况要素***为敏感,因而粒腺体的心理情况可代表上海金相抛光机的心理情况。当复原才能强时,表现克氏循(Kreb’s cycle)环举行速率快,可发生较多的能量供上海金相抛光机利用,故可代表上海金相抛光机的安康情况
精良

二、试剂
1. 5mg/ml MTT 溶液(溶剂:1X PBS),避光 4℃保管。
2. Dimethyl sulfoxide(DMSO):Sigama

三、
实行步调
1. 每孔留下 350μl 的留胞培育液,参加 35μl MTT 溶液(黄色),避
光并静置室温下反响 1 小时。
2. 移除含有 MTT 的上海金相抛光机培育液,参加 350μl DMSO 以消融紫色颗粒。
待紫色颗粒完全消融后,每孔各取 125μl 的紫色溶液置入 96-well
RIA/EIA plate 中,设定波长为 570 nm(630 nm 看成参考波长),测其
吸光值。吸光值越高,表现 MTT-formazan 产量越高,即代表上海金相抛光机之
存活率越高。
3. 盘算上海金相抛光机上海金相抛光机存活率=样品吸光值 / 控制组吸光值 × 100﹪

 


 
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